WWW.OS.X-PDF.RU
БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА - Научные публикации
 


Pages:   || 2 |

«РАЗРАБОТКА СРЕДСТВ СПЕЦИФИЧЕСКОЙ ПРОФИЛАКТИКИ РЕПРОДУКТИВНО-РЕСПИРАТОРНОГО СИНДРОМА СВИНЕЙ ...»

-- [ Страница 1 ] --

На правах рукописи

КУКУШКИН Сергей Анатольевич

РАЗРАБОТКА СРЕДСТВ СПЕЦИФИЧЕСКОЙ ПРОФИЛАКТИКИ

РЕПРОДУКТИВНО-РЕСПИРАТОРНОГО СИНДРОМА СВИНЕЙ

Специальность 16.00.03 – ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени

доктора ветеринарных наук

Москва-2009

Работа выполнена в Федеральном государственном учреждении «Федеральный центр охраны здоровья животных» (ФГУ «ВНИИЗЖ»), г. Владимир

Официальные оппоненты:

доктор ветеринарных наук, КОЛОМЫЦЕВ Алексей Александрович старший научный сотрудник Всероссийский научно-исследовательский институт ветеринарной вирусологии и микробиологии (ГНУ ВНИИВВиМ), г. Покров Владимирской обл.

доктор ветеринарных наук, профессор, УЗЮМОВ Василий Лаврентьевич заслуженный деятель науки РСФСР ФГУ «Федеральный центр охраны здоровья животных»

(ФГУ «ВНИИЗЖ»), г. Владимир доктор биологических наук, профессор, ЕРЕМЕЦ Владимир Иванович заслуженный деятель науки РФ ГНУ «Всероссийский научно-исследовательский и технологический институт биологической промышленности» (ГНУ «ВНИТИБП»), г. Щелково Московской обл.



Ведущая организация:

ГНУ Всероссийский научно-исследовательский ветеринарный институт патологии, фармакологии и терапии (ГНУ ВНИВИПФиТ), г. Воронеж

Защита диссертации состоится «____» марта 2009г. в 12-00 часов на заседании диссертационного совета Д 212.203.32 при Российском университете дружбы народов по адресу: 117198, г. Москва, ул. Миклухо-Маклая, д.8, корп. 2.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Российского университета дружбы народов.

Автореферат диссертации размещен на сайте РУДН – www.rudn.ru.

Автореферат разослан «___» _______________ 2009г.

Ученый секретарь диссертационного совета доктор ветеринарных наук, профессор С.Б. Селезнев

1.

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. Успешному развитию свиноводства во многом препятствуют различные инфекционные болезни, которые наносят большой экономический ущерб, обуславливая снижение продуктивности животных и низкую рентабельность отрасли. В начале 90-х годов прошлого столетия к их числу добавилось новое заболевание

- репродуктивно-респираторный синдром свиней (РРСС), которое в последние годы наносит значительный ущерб индустриальному свиноводству во всем мире.

Впервые это заболевание было зарегистрировано в свиноводческих хозяйствах США и Канады в 1986-1987 гг. и быстро распространилось по всему миру (Keffaber, K.K.,1989; Bilodeau R.,1991; Mardassi H.,1994). В 1990 году РРСС установлен в Германии, а к середине 90-х годов им была охвачена почти вся Европа (Christianson W.T., Joo H.S.,1994; Albina E.,1998). С 1993 года он регистрируется в России и в других странах СНГ (А.Л. Семенихин и др.,1992; В.А. Мищенко и др.,1994; В.О. Бусол и др.,1994 и др.).

Заболевание характеризуется поздними абортами (90-109 дней cупоросности), преждевременными родами (110-112 дней), прохолостами свиноматок, рождением мертвых, мумифицированных, нежизнеспособных поросят, гибелью новорожденных поросят и поражением органов дыхания у поросят-отъемышей, групп доращивания и откорма (В.А. Мищенко и др.,1994; Т.З. Байбиков и др.,1998; Albina E.,1997).

Возбудителем болезни является РНК-содержащий вирус, относящийся к роду Arterivirus, семейство Arteriviridae, порядок Nidovirales. В мире существует два генотипа вируса РРСС: американский и европейский (Murphy F.A.,1995; Dea S. et al.,1999). Сравнительный анализ нуклеотидных последовательностей российских изолятов вируса РРСС показал, что все они относятся к европейской геногруппе (А.В. Щербаков и др.,2003; Andreyev V.G. et al.,1999). Однако в последние годы в некоторых отечественных хозяйствах был выделен вирус РРСС американской геногруппы (К.Н. Груздев и др.,2006; Т.З. Байбиков,2008).

РРСС наносит ощутимый экономический ущерб свиноводству многих стран мира, который только в США ежегодно составляет 560 миллионов долларов. Убытки при РРСС исчисляются в 100-236 долларов США на свиноматку при острой вспышке болезни и до 502 долларов при хроническом течении.

Основным методом профилактики, контроля и борьбы с РРСС в странах с промышленным свиноводством остается специфическая профилактика с использованием живых и инактивированных вакцин (Т.З. Байбиков и др.,1998,2000; Б.Г. Орлянкин и др.,2000; Kang Y.B. et al.,1996; Mengeling W.L. et al.,2003; Gambade P. et al.,2007).

В связи с этим разработка, усовершенствование и оценка эффективности применяемых средств специфической профилактики РРСС является актуальной задачей для развития отечественного свиноводства.

Цель и задачи научных исследований. Главной целью исследований являлась разработка и внедрение в ветеринарную практику эффективных средств специфической профилактики репродуктивно-респираторного синдрома свиней.

Для достижения поставленной цели необходимо было решить следующие задачи:

- оценить эпизоотическую ситуацию по РРСС в Российской Федерации в 1997гг. и изучить клинико-эпизоотологическое проявление репродуктивной, респираторной и атипичной форм РРСС при остром, хроническом и ассоциированном течении заболевания в хозяйствах различного типа и направления;





- изучить иммунобиологические свойства отечественных изолятов вируса РРСС, отобрать штаммы, обладающие стабильными антигенными свойствами, для использования их в качестве производственных;

- разработать технологию крупномасштабного культивирования производственных штаммов вируса РРСС;

- разработать режимы инактивации вируса РРСС;

- подобрать адъюванты для изготовления инактивированных вакцин против РРСС;

- разработать технологию приготовления вакцинных препаратов против РРСС и методы их контроля;

- провести испытания и дать оценку эффективности разработанных препаратов в экспериментальных и производственных условиях;

- разработать инструкции по применению вакцин против РРСС;

- освоить промышленное производство живой и инактивированных вакцин против РРСС и внедрить их в ветеринарную практику;

- разработать и проверить в производственных условиях схему вакцинопрофилактики РРСС;

- оценить эффективность средств и методов борьбы с РРСС в свиноводческих хозяйствах России;

- подготовить и утвердить нормативно-техническую документацию на разработанные биопрепараты.

Научная новизна исследований. Дана оценка эпизоотической ситуации по РРСС в Российской Федерации в 1997-2007гг. Изучены особенности клиникоэпизоотологического проявления репродуктивной, респираторной и атипичной форм РРСС при остром, хроническом и ассоциированном течении заболевания в хозяйствах различного типа и направления. Впервые в результате клинико-эпизоотологического мониторинга РРСС показана степень его распространения на территории Российской Федерации.

Изучены иммунобиологические свойства полевых изолятов вируса РРСС, отобраны штаммы, обладающие стабильными антигенными свойствами, для использования их в качестве производственных.

Отобраны в качестве вакцинных и депонированы в коллекции микроорганизмов ФГУ «ВГНКИ» производственные штаммы «БД-ДЕП» и «КПР-96»-ДЕП вируса РРСС, отработана технология их крупномасштабного культивирования в перевиваемой культуре клеток Marc-145.

Разработаны технологии изготовления и наставления по применению вирусвакцины против РРСС, эмульсионной инактивированной вакцины против РРСС и эмульсионной инактивированной ассоциированной вакцины против РРСС и парвовирусной инфекции свиней на основе отобранных штаммов.

Освоено промышленное производство живой и инактивированных вакцин против РРСС, которые успешно внедрены в ветеринарную практику.

Научная новизна исследований подтверждена 7 патентами Российской Федерации:

- Патент на изобретение №2220202 «Штамм «БД» вируса репродуктивнореспираторного синдрома свиней для изготовления диагностических и вакцинных препаратов» (2003г.);

- Патент на изобретение №2232596 «Способ изготовления вирус-вакцины против репродуктивно-респираторного синдрома свиней» (2004г.);

- Патент на изобретение №2236253 «Вакцина эмульсионная инактивированная против репродуктивно-респираторного синдрома свиней» (2004г.);

- Патент на изобретение №2236254 «Способ изготовления вакцины эмульсионной инактивированной против репродуктивно-респираторного синдрома свиней» (2004г.)

- Патент на изобретение №2269361 «Вакцина ассоциированная эмульсионная инактивированная против репродуктивно-респираторного синдрома и парвовирусной инфекции свиней» (2006г.).

- Патент на изобретение №2295567 «Штамм «КПР-96» вируса репродуктивнореспираторного синдрома свиней для изготовления диагностических и/или вакцинных препаратов» (2007г.);

- Патент на изобретение №2316346 «Вакцина против репродуктивнореспираторного синдрома свиней эмульсионная инактивированная» (2008г.).

Практическая значимость исследований. Установлена степень распространения РРСС на территории Российской Федерации и Республики Беларусь, определены особенности клинического проявления репродуктивной, респираторной и атипичной форм РРСС при остром, хроническом и ассоциированном течении заболевания в хозяйствах различного типа и направления.

Разработаны технологии изготовления и инструкции по применению вирусвакцины против РРСС, эмульсионных инактивированных моно- и ассоциированных вакцин против РРСС и обоснована их эффективность. Внедрена в ветеринарную практику и широко используется для борьбы и профилактики РРСС комплексная схема вакцинопрофилактики РРСС, применение которой в свиноводческих хозяйствах Российской Федерации и Республики Беларусь показало ее высокую профилактическую эффективность.

Результаты научных исследований вошли в нормативную документацию (НД), утвержденную Департаментом ветеринарии Минсельхозпрода России и Россельхознадзором МСХ РФ:

1. НД на «Вирусвакцину сухую культуральную против репродуктивнореспираторного синдрома свиней» (ТУ 9384-027-00008064-99 и «Наставление по применению вирусвакцины …»), 10.06.1999г.;

2. Изменения в ТУ 9384-027-00008064-99 «Вирусвакцина сухая культуральная против РРСС» (изменение методов контроля антигенной активности и определение биологической активности вирусвакцины), извещение №1 от 01.04.2005г.;

3. «Инструкция по применению вирусвакцины сухой культуральной против РРСС» (вместо «Наставления по применению …» с изменением схемы иммунизации и биологических свойств вирусвакцины), 15.02.2006г.

4. НД на «Вакцину эмульсионную инактивированную против репродуктивнореспираторного синдрома и парвовирусной инфекции свиней» (ТУ 9384-026-00008064и «Наставление по применению вакцины …»), 30.06.1999г.;

5. Изменения в ТУ 9384-026-00008064-99 «Вакцина эмульсионная инактивированная против РРСС и ПВИС» (изменение методов контроля вакцины), извещение №1 от 04.04.2005г.;

6. Изменения в ТУ 9384-026-00008064-99 «Вакцина эмульсионная инактивированная против РРСС и ПВИС» (замена штамма «БД-ДЕП» на штамм «КПР-96»-ДЕП), извещение №2 от 04.04.2005г.;

7. «Инструкция по применению вакцины эмульсионной инактивированной против РРСС и ПВИС» (вместо «Наставления по применению …» с изменением схемы иммунизации и биологических свойств вакцины), 15.02.2006г.;

8. НД на «Вакцину эмульсионную инактивированную против репродуктивнореспираторного синдрома свиней» (ТУ 9384-153-00495527-2005 и «Инструкция по применению вакцины …»), 30.06.2006г.

Публикация научных исследований. По теме диссертации опубликовано 78 научных работ, в том числе 12 работ в изданиях по перечню ВАК РФ.

Апробация работы. Материалы диссертации доложены, обсуждены и одобрены на Международных и всероссийских научных, научно-практических конференциях (Владимир, 1998;2000;2004;2005; Щелково,2000;2002;2005; Омск,2000; Витебск, 2001;

Иваново, 2005; Казань, 2005; Воронеж, 2005; Харьков, 2003;2005; Минск, 2005; Киев, 2006; Киров,2007), на 6-м и 7-м Международных симпозиумах по кабанам (Киккос, Кипр, 2006; Шопрон, Венгрия, 2008), XIV и XV Московских международных ветеринарных конгрессах (Москва, 2006;2007), 5-ом Международном симпозиуме по эмерджентным и ре-эмерджентным болезням свиней (Краков, Польша,2007), Международных симпозиумах по РРСС (Чикаго, США, 2007;2008), 4-ом Международном симпозиуме Россия-Евросоюз (Суздаль, 2007), 20-ом Международном ветеринарном конгрессе по свиноводству (Дурбан, ЮАР, 2008), зональных и межрегиональных научнопрактических семинарах ветеринарных специалистов (Ярославль, Белгород, Казань, Киров, Иркутск, Краснодар, Новосибирск, Саранск, Москва, Кустанай, Минск, 2002-2008), заседании секции «Инфекционная патология животных» Отделения ветеринарной медицины РАСХН (Москва, 2008), а также на заседаниях ученого совета ФГУ «ВНИИЗЖ»

в 1998-2008гг.

Структура и объем работы. Диссертация изложена на 370 страницах и содержит следующие разделы: введение, обзор литературы, результаты собственных исследований, обсуждение результатов исследований, выводы, практические предложения и приложения. Список литературы включает 475 источников, в том числе 99 работ на русском языке. Работа иллюстрирована 28 рисунками и 93 таблицами.

Личный вклад соискателя. Работа выполнена соискателем самостоятельно. В выполнении отдельных этапов работы принимали участие д.в.н., профессор Т.З. Байбиков, к.в.н. Е.К. Долганова, к.б.н. Е.П. Баборенко, к.в.н. И.А. Пронин, к.в.н. И.А. Тетерин, к.в.н. И.Я. Курман, к.в.н. Н.С. Дудникова, к.в.н. А.М. Тимина, к.в.н. А.В. Каньшина, к.б.н. А.В. Щербаков, за что автор приносит им сердечную благодарность.

Основные положения, выносимые на защиту:

- степень распространения РРСС на территории РФ;

- особенности течения и клинического проявления болезни;

- характеристика иммунобиологических свойств ряда изолятов вируса РРСС, циркулирующих на территории РФ;

- подбор и характеристика вакцинных штаммов вируса РРСС;

- разработка средств специфической профилактики РРСС;

- схемы применения живых и инактивированных вакцин против РРСС;

- оценка результатов производственного применения специфических средств профилактики РРСС в хозяйствах РФ и Республики Беларусь.

Исследования по диссертационной работе являются частью комплексных тем НИР «Проведение исследований по разработке и освоению в условиях производства средств и методов борьбы с особо опасными и карантинными болезнями и инфекциями сельскохозяйственных животных» (государственный контракт №808/26) и «Совершенствование методов диагностики и профилактики инфекционных заболеваний свиней»

(шифр «Ветеринарное благополучие» 3-02), которые выполнялись в 1997-2008гг. в ФГУ «Федеральный центр охраны здоровья животных» (ФГУ «ВНИИЗЖ», г. Владимир).

2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ Оценка эпизоотической ситуации по РРСС. При анализе эпизоотической ситуации по РРСС в странах мира, России, а также в отдельных регионах и хозяйствах использовали статистические данные Всемирной организации здравоохранения животных (МЭБ), отчеты ветеринарных служб разных уровней и сотрудников ФГУ «ВНИИЗЖ», принимавших участие в обследовании свиноводческих хозяйств в различных регионах страны, а также собственные материалы, собранные в течение 1997-2008гг., в том числе в результате командировок, во время которых осуществлялось непосредственное участие в обследовании хозяйств и оказании консультативной помощи в планировании, организации и проведении противоэпизоотических мероприятий. Такие командировки состоялись в свиноводческие хозяйства Архангельской, Белгородской, Владимирской, Вологодской, Воронежской, Ивановской, Иркутской, Костромской, Ленинградской, Московской, Нижегородской, Новгородской, Новосибирской, Омской, Оренбургской, Пермской, Псковской, Ростовской, Тверской, Тульской, Ульяновской, Ярославской областей, Краснодарского, Красноярского, Хабаровского краев России, а также Республики Беларусь. Эпизоотологическое обследование свиноводческих хозяйств проводили по рекомендациям, описанным в работах И.А. Бакулова и др. (1975) и С.И. Джупины (1991).

Вирусы. В работе использованы следующие штаммы вируса РРСС: прототипный штамм Lelystad (Нидерланды) европейского генотипа; NVSL (США) американского генотипа; № 2156 (Италия) европейского генотипа; BIS-046 (Испания) европейского генотипа; вакцинные штаммы «БД» и «КПР-96» (ФГУ «ВНИИЗЖ»). В экспериментах также были использованы российские изоляты вируса РРСС, выделенные и идентифицированные в ФГУ «ВНИИЗЖ» в 1996-2007гг.

Животные и культуры клеток. В опытах использовали свиней разных возрастных групп из благополучных по РРСС и другим инфекционным заболеваниям хозяйств. Для выделения и культивирования вируса РРСС использовали перевиваемую культуру клеток Marc-145 и альвеолярные макрофаги свиньи (АМС).

Материалом для выделения вируса РРСС являлись кровь и 20%-ные суспензии из легких, подчелюсных, бронхиальных, средостенных лимфатических узлов, селезенки, почки от нежизнеспособных, больных или павших поросят-сосунов и подсвинков группы доращивания. Кровь и полученную суспензию использовали для заражения культур клеток и свиней.

Серологические исследования. Наличие специфических антител к вирусу РРСС в сыворотках крови свиней определяли в реакциях ИФА, РНГА, НРИФ по методикам, утвержденным директором ФГУ «ВНИИЗЖ», а также с использованием коммерческих наборов ИФА: HerdChek PRRS ELISA, HerdChek PRRS 2XR Antibody Test Kit (IDEXX, Westbrook, ME, США), CIVTEST PRRS (HIPRA, Испания), INGEZIM PRRS Europa, INGEZIM PRRS America (Ingenasa, Испания).

Заражение животных. В экспериментальных исследованиях о наличии вируса РРСС в исследуемых пробах (суспензия патматериала, вируссодержащая культуральная жидкость и др.) судили по появлению характерных клинических признаков у зараженных животных, цитопатических изменений в культурах клеток и подтверждению обнаружения вируса РРСС в НРИФ, генома вируса с помощью ПЦР или выявлению специфических антител в серологических реакциях.

Инактивация вируса. Для инактивации вируса РРСС использовали формальдегид (Россия), аминоэтилэтиленимин (Россия) и -пропиолактон (Natalex S.A., Польша).

Изготовление вакцин. Для изготовления экспериментальных образцов вакцин использовали различные масляные адъюванты: комплексный адъювант ФГУ «ВНИИЗЖ», состоящий из минерального масла MARCOL-52 (ESSO, Франция), эмульгатора №139 и ланолина, тип эмульсии «вода в масле»; ряд традиционных и новых коммерческих адъювантов компании SEPPIC (Франция): Montanide ISA 70, Montanide ISA 206, Montanide IMS 1313 N PR VG, Montanide ESSAI PS 60638, Montanide ESSAI IMS 251c.

Экспериментальные серии инактивированных эмульсионных вакцин готовили на коллоидной мельнице типа К100/0 с зазором ножей 0,1-0,2. Безвредность экспериментальных вакцин проверяли на белых мышах и подсвинках, которым подкожно и внутримышечно вводили по 0,5 см3 и 5,0 см3 вакцины, соответственно. За животными вели наблюдение в течение 10 и 15 суток, соответственно, после чего их умерщвляли и проводили патологоанатомическое вскрытие.

Эффективность разработанных препаратов изучали в экспериментальных и производственных условиях путем сравнения основных эпизоотологических показателей (заболеваемость, смертность, сохранность, выход поросят на свиноматку и др.) в опытных и контрольных группах. Напряженность иммунитета оценивали по уровню специфических антител в сыворотках крови привитых животных.

Статистическая обработка результатов. При статистической обработке результатов исследований были использованы общепринятые методы, рекомендованные Гланцем С. (1999) и другими авторами, а также компьютерные программы MicrocalTM OriginTM Version 5,0, 1991-1997 Microcal Software, Inc и Microsoft Office Excel 2003.

–  –  –

Таким образом, РРСС имеет глобальное распространение и большинство стран, где свиноводство хорошо развито, неблагополучны по этому заболеванию. Несмотря на широкое осуществление специфической профилактики и жестких санитарных мер, РРСС остается серьезной проблемой для современного промышленного свиноводства.

–  –  –

Как видно из табл. 2, во всех хозяйствах, за исключением СХПК АПК «Надеево»

Вологодской обл. и ОАО «Кудряшовское» Новосибирской обл., уровень абортов и мертворождений не превышал 9%. Высокий уровень прохолостов в ряде хозяйств был обусловлен другими возбудителями, а также грубыми нарушениями технологии содержания животных.

Наши наблюдения также показали, что без принятия надлежащих мер борьбы и профилактики РРСС во время острой вспышки болезни или при их неправильном выполнении, заболевание, как правило, переходит в хроническую форму. Особенно это заметно в крупных свинокомплексах, где хроническая форма РРСС с периодическими обострениями может наблюдаться годами.

В результате обследования хозяйств установлено, что РРСС наиболее часто протекает в ассоциации с другими инфекционными заболеваниями. Наиболее часто ассоциированные формы РРСС встречаются у поросят во время доращивания и откорма при респираторной форме, обуславливая развитие так называемого комплекса респираторных болезней свиней (PRDC). От поросят с PRDC, кроме вируса РРСС, также наиболее часто выделяли цирковирус свиней типа 2 (ЦВС-2), Haemophilus parasuis, Pasteurella multocida, Mycoplasma hyopneumoniae, Mycoplasma hyorhinis, стрептококков. Массовое заболевание поросят в большинстве хозяйств начиналось в возрасте 50-70 дней.



В конце августа 2007г. в Иркутской области была зарегистрирована первая на территории России вспышка атипичного РРСС, вызванная высоковирулентным изолятом вируса РРСС американского генотипа. У больных свиней, включая откормочных свиней, свиноматок и хряков, наблюдали угнетение, анорексию, цианоз кожи ушей, конечностей, живота, мошонки, гипертермию до 41,2С, кашель, диарею, отек и паралич задних конечностей. У свиноматок отмечали массовые аборты и рождение мертвых поросят. Наибольший уровень гибели регистрировали среди поросят до 4-месячного возраста – до 69,7%, наименьший среди взрослых животных – до 3,3%.

Изучение иммунобиологических свойств изолята «Иркутский 2007» вируса РРСС, проведенное совместно с сотрудниками лаборатории диагностики особо опасных болезней животных ФГУ «ВНИИЗЖ» (к.б.н. А.В. Щербаков, к.в.н. А.М. Тимина), показало, что он по ОРС 7 имеет 100% гомологию с изолятом JXA1, выделенным в Китае в 2006г во время эпизоотии атипичного РРСС, и маркерный признак – делецию 90 нуклеотидных оснований (30 аминокислот) в гене Nsp 2, характерную для всех высоковирулентных китайских изолятов вируса РРСС.

Таким образом, РРСС широко распространен на территории России, при этом регистрировали как репродуктивную, так и респираторную формы болезни, а также атипичный РРСС. В связи с этим вакцинопрофилактика предусматривается как основное звено при борьбе и профилактике РРСС и в нашей стране.

–  –  –

Таким образом, проведенные исследования показали, что на территории России и Белоруссии циркулируют изоляты вируса РРСС с различными иммунобиологическими свойствами. Из изученных изолятов вируса РРСС изоляты «Белорусский-01» и «Иркутский 2007» оказались наиболее патогенным для поросят-отъемышей.

В результате проведенных исследований в качестве вакцинных были отобраны ранее выделенные штаммы «БД» и «КПР-96», а в качестве контрольных – штамм Lelystad и изоляты «БР-01» и «Иркутский-2007».

2.2.4. Оценка иммунобиологических свойств штаммов «БД» и «КПР-96»

вируса РРСС, отобранных в качестве вакцинных С целью изучения антигенных свойств штамма «БД» вируса РРСС были проведены опыты на трех группах подсвинков, которые были внутримышечно иммунизированы штаммом «БД» в дозе 2104,0, 2103,0, 2102,0 ТЦД50/см3, соответственно. Через 30 дней после иммунизации подопытных и контрольных подсвинков заражали вирулентным штаммом Lelystad вируса РРСС внутрипульмонально в дозе 10105,0 ТЦД50/см3. У поросят, иммунизированных штаммом «БД» в различных дозах, в сыворотках крови выявлен высокий уровень специфических к вирусу РРСС антител, начиная с 14-ти дней после иммунизации. Максимальный уровень антител установлен к 28 суткам после иммунизации. На контрольное заражение вирулентным вирусом Lelystad они не реагировали. В то же время два контрольных подсвинка заболели с типичной клинической картиной РРСС.

Изучение культуральных свойств изолята «Кемеровский-96» показало, что он хорошо размножается, вызывает четко выраженное ЦПД и накапливается до 5,0 lg ТЦД50/см3 в перевиваемой культуре клеток Marc-145. Далее нами было проведено подробное изучение его иммунобиологических свойств.

Специфичность и генетическую принадлежность изолята «Кемеровский-96» к европейской геногруппе подтвердили с помощью ПЦР, а также исследованием сывороток крови после иммунизации поросят этим изолятом, с помощью дифференцирующих наборов ИФА INGEZIM PRRS фирмы Ingenasa (Испания), позволяющим различать антитела к европейскому и американскому генотипам вируса РРСС. Для этого 5 серонегативных поросят иммунизировали внутримышечно инактивированным аминоэтилэтиленимином вирусом. К 21 дню после иммунизации в сыворотках крови всех животных выявлены антитела только к вирусу РРСС европейского генотипа и не обнаружено антител к американскому генотипу. Спустя 28 дней после иммунизации к американскому генотипу положительной была только 1 проба, а при исследовании сывороток крови в более отдаленные сроки положительными были 4 пробы из 5 (рис. 1).

–  –  –

Рис. 1. Динамика накопления антител к разным генотипам вируса РРСС после иммунизации поросят изолятом «Кемеровский-96»

Как видно из рис. 1, значительное повышение среднего уровня антител к европейскому генотипу вируса у поросят после их иммунизации подтверждает принадлежность изолята «Кемеровский-96» к европейской геногруппе вируса РРСС. Иммунизированные поросята оставались серонегативными по отношению к вирусам ПВИС, болезни Ауески, КЧС, ТГЭС, гриппа и Mycoplasma hyopneumoniae, что подтверждает отсутствие контаминации изолята «Кемеровский-96» этими возбудителями.

Степень вирулентности изолята «Кемеровский-96» для свиней изучали на серонегативных в отношении РРСС подсвинках 2-4-месячного возраста и супоросных свиноматках.

У трех из шести зараженных поросят регистрировали лишь кратковременное повышение температуры тела до 40,7°С, однако после инфицирования все животные стали серопозитивными к вирусу РРСС. Степень вирулентности изолята «Кемеровский-96»

была также испытана на двух супоросных свиноматках, которые на 85-88 день супоросности были интраназально заражены в дозе 10105,0 ТЦД50/см3. Обе свиноматки опоросились на 114 день после осеменения и от них получено 23 поросенка, из них 18 живых здоровых поросят (78,3%). У одной из них родилось 2 нежизнеспособных поросенка (8,7%) и 3 с патологией глаз (13%). Следовательно, изолят «Кемеровский-96» вируса РРСС является слабовирулентным для свиней.

После всестороннего изучения иммунобиологических свойств изолята «Кемеровский-96» вируса РРСС он был комиссионно испытан и депонирован в коллекции штаммов и микроорганизмов ФГУ «ВГНКИ» под наименованием «КПР-96»-ДЕП. В результате комиссионных испытаний по депонированию вакцинного штамма «КПР-96»ДЕП вируса РРСС было установлено, что вакцинный штамм «КПР-96»-ДЕП вируса РРСС не контаминирован вирусной, бактериальной и грибковой микрофлорой, специфичен, обладает выраженной антигенной активностью на подсвинках, слабовирулентный.

Полученные результаты исследований по изучению иммунобиологических свойств штамма «КПР-96»-ДЕП вируса РРСС были подтверждены выдачей патента РФ на изобретение №2295567 «Штамм «КПР-96» вируса репродуктивно-респираторного синдрома свиней для изготовления диагностических и/или вакцинных препаратов» (2007г.).

2.2.5. Разработка сухой культуральной вирусвакцины против РРСС из штамма «БД»

В результате проведенных исследований был отработан режим крупномасштабного культивирования штамма «БД-ДЕП» вируса РРСС, включающий получение антигена в клинских матрасах или роллерах с использованием 3-суточной перевиваемой культуры клеток Marc-145, питательной среды Игла с добавлением 2,5-5,0% фетальной сыворотки КРС, 50 мкг/см3 гентамицина, 0,3 мг/см3 глутамина и временем культивирования до 48 часов при температуре 37°С. С использованием указанного режима накопление вируса достигало титра до 7,5 lg ТЦД50/см3 при стационарном культивировании и до 8,3 lg ТЦД50/см3 при использовании роллеров.

После наработки вирусного сырья его использовали для составления вирусвакцины. В качестве защитной среды при изготовлении сухой культуральной вирусвакцины против РРСС была использована известная среда ФГУ «ВНИИЗЖ», состоящая из сахарозы, гидролизата лактоальбумина и желатозы. Количество защитной среды для лиофилизации составляло 400 см3 на 1000 см3 вирусного сырья.

Для контроля вирусвакцины сухой культуральной против РРСС из штамма «БДДЕП» были отобраны традиционные параметры, использующиеся при контроле живых вирусвакцин: внешний вид; отсутствие контаминации бактериальной и грибковой микрофлорой; массовая доля влаги (остаточная влажность); растворимость; безвредность;

антигенная активность; биологическая активность.

Результаты контроля безвредности вирусвакцины из штамма «БД-ДЕП» показали, что введение препарата лабораторным животным (кролики, морские свинки, белые мыши) и подсвинкам 2-4-месячного возраста в дозе 104,0 ТЦД50/см3 не вызывает каких-либо клинических изменений в их состоянии. В лабораторных условиях антигенная активность вакцины была изучена на 10 поросятах 2-3-месячного возраста. В сыворотках крови поросят специфические антитела в ИФА IDEXX обнаруживались в достаточно высоком уровне к 14 дню, среднее значение s/p по группе составляло 0,69±0,10 и к 33 дню достигло 1,22±0,10. Через 33 дня после иммунизации поросят интраназально заразили вирусом РРСС штамм Lelystad в дозе 10104,5 ТЦД50/см3. Поросята, иммунизированные сухой вирусвакциной, в большинстве на контрольное заражение не реагировали, только у отдельных животных отмечали незначительное повышение температуры тела. Все три контрольных животных заболели с типичной клинической картиной РРСС.

Кроме того, две свиноматки на 28 и 30 дни супоросности были привиты сухой вирусвакциной. Перед опоросом в сыворотках крови свиноматок были выявлены высокие титры антител. Эти свиноматки принесли 24 поросенка, из них 20 здоровых (83,3%), 2 слаборожденных (8,3%), 1 мертворожденного (4,2%) и 1 мумифицированного (4,2%).

Сохранность среди живых здоровых поросят за время подсосного периода составила 100%.

Эффективность сухой культуральной вирусвакцины против РРСС из штамма «БД» была изучена в 4 крупных свинокомплексах («Кузнецовский» Московской области, «Надеево» Вологодской области, «Ильиногорское» Нижегородской области и «Лазаревское» Тульской области), которые были неблагополучными по РРСС (табл. 4).

Таблица 4 Уровень снижения смертности поросят-отъемышей после применения сухой культуральной вирусвакцины против РРСС Свинокомплексы Анализируемая Cнижение смертноСмертность до Смертность продолжитель- сти в результате вакцинации, после вакциность вакцина- вакцинации, % нации, % % ции, мес.

«Надеево» 6,8 4,9 1 27,9 «Лазаревское» 6,0 5,8 4 3,3 «Кузнецовский» 33,2 17,2 5 48,2 «Ильиногорское» 40,7 20,2 7 50,4 Как видно из табл. 4, через месяц после вакцинации в ЗАО «Надеево» смертность поросят сократилась на 27,9%, а в течение 5 месяцев применения вакцины в свинокомплексе «Кузнецовский» смертность уменьшилась на 48,2%. В свинокомплексе «Ильиногорское» через 7 месяцев вакцинации показатель смертности снизился на 50,4%. Только в одном хозяйстве - АО «Лазаревское» вакцина не оказала ожидаемого результата и за 4 месяца ее применения смертность поросят-отъемышей снизилась всего на 3,3%. Это можно объяснить тем, что в этом свинокомплексе имело место ассоциативное течение РРСС с энзоотической пневмонией (микоплазмозом), а также с рядом бактериальных заболеваний, против которых не проводилось эффективного лечения.

Таким образом, сухая культуральная вирусвакцина против РРСС из штамма «БДДЕП» обладает высокой иммуногенностью, позволяет увеличить сохранность молодняка и стабилизировать эпизоотическую ситуацию по РРСС. Однако на фоне ассоциативного течения РРСС с другими инфекционными заболеваниями и при отсутствии мер борьбы с ними эффективность сухой культуральной вирусвакцины против РРСС значительно снижается.

Результаты этих исследований были использованы при составлении НТД на «Вирусвакцину сухую культуральную против репродуктивно-респираторного синдрома свиней» и наставления по ее применению.

Кроме того, в результате проведенных исследований и по рекомендации ФГУ «ВГНКИ» в 2005 году в действующих ТУ 9384-027-00008064-99 на «Вирусвакцину сухую культуральную против РРСС» были изменены параметры метода контроля антигенной активности вируса РРСС и четко определены показатели биологической активности антигена в вирусвакцине. Изменения, внесенные в действующие ТУ, были согласованы с ФГУ «ВГНКИ» и утверждены Россельхознадзором в установленном порядке.

2.2.6. Разработка эмульсионной инактивированной вакцины против РРСС После всестороннего изучения иммунобиологических свойств вируса РРСС, отбора вакцинных штаммов и отработки оптимальных условий их культивирования нами были проведены работы по разработке эмульсионной инактивированной вакцины против РРСС, необходимость создания которой была обусловлена недостаточной безопасностью живых препаратов для репродуктивного поголовья.

Данная работа включала разработку технологии получения вирусного сырья, режимов инактивации вируса РРСС, испытание изготовленных образцов вакцины в экспериментальных и производственных условиях, разработку методов контроля препарата и нормативной документации.

Процесс изготовления эмульсионной инактивированной вакцины против РРСС состоял из нескольких основных этапов: получение, поддержание и контроль матриксной серии вируса РРСС; получение производственной серии вируса РРСС; получение вирусного сырья и его инактивация; эмульгирование инактивированного антигена и адъюванта; контроль производственных серий вакцины.

Для отработки режимов инактивации вируса РРСС нами были испытаны традиционные инактиванты, использующиеся в ветеринарной биотехнологии: формальдегид, аминоэтилэтиленимин (АЭЭИ) и -пропиолактон. Для проведения экспериментальных исследований был использован штамм «КПР-96»-ДЕП вируса РРСС, репродуцированный в перевиваемой культуре клеток Marc-145 с титром вируса 6,0±0,25 lg ТЦД50/см3. В результате проведенных экспериментов было установлено, что для полной инактивации штамма «КПР-96» вируса РРСС необходима концентрация формальдегида 0,05% при 37°С в течение 12 часов, для -пропиолактона – 0,025-0,1% при 4°С в течение 6 часов, для АЭЭИ – 0,05% при 37°С и времени экспозиции 12 часов.

Опыты, проведенные на 20 взрослых кроликах и 17 поросятах 2-месячного возраста, показали, что наиболее высокой антигенной активностью обладали образцы вакцины, содержащие антиген инактивированный -пропиолактоном и АЭЭИ. Учитывая полученные результаты, а также согласно экономическим расчетам себестоимости получаемого антигена и рекомендациям МЭБ, дальнейшую работу по разработке инактивированных вакцин проводили с использованием АЭЭИ.

Поиск наиболее оптимальных адъювантов для инактивированных вакцин против РРСС проводили путем конструирования опытных образцов моно- и ассоциированных вакцин против РРСС и ПВИС.

Для изготовления экспериментальных образцов вакцин использовали ГОА, а также различные масляные адъюванты: комплексный адъювант ФГУ «ВНИИЗЖ», состоящий из минерального масла MARCOL-52 (ESSO, Франция), эмульгатора №139 и ланолина, тип эмульсии «вода в масле»; ряд традиционных и новых коммерческих адъювантов компании SEPPIC (Франция): Montanide ISA 70, Montanide ISA 206, Montanide IMS 1313 N PR VG, Montanide ESSAI PS 60638, Montanide ESSAI IMS 251c.

В результате всестороннего изучения различных адъювантов в качестве основного (базового) для изготовления инактивированных вакцин против РРСС был выбран адъювант Montanide ISA 70, обеспечивающий наиболее высокую антигенную активность и умеренную реактогенность препаратов на его основе.

В качестве альтернативных адъювантов, обеспечивающих умеренную антигенную активность и не обладающих реактогенностью, для иммунизации поросят откормочных групп в неблагополучных хозяйствах без проявления острой респираторной формы РРСС возможно использование адъювантов Montanide IMS 1313 N PR VG и Montanide ESSAI IMS 251c.

Для контроля эмульсионной инактивированной вакцины против РРСС были отобраны традиционные параметры, использующиеся при контроле инактивированных вакцин: внешний вид, отсутствие посторонней примеси, плесени, хлопьев (не разбившегося осадка), трещин флаконов, стерильность (отсутствие контаминации бактериальной и грибковой микрофлорой), стабильность, вязкость, полнота инактивации вируса, безвредность, антигенная активность.

Образцы инактивированных эмульсионных вакцин против РРСС с прививной дозой 2,0 см для оценки безвредности вводили белым мышам в объеме 0,5 см3, кроликам и мор

–  –  –

Данные табл. 6 показывают, что перед ревакцинацией 7 животных из 10 первично иммунизированных были сероположительными, а средний уровень антител по группе составил 0,8±0,61. Через 7 дней после ревакцинации сероположительными стали 9 животных, среднее значение s/p по группе равнялось 1,58±0,64. Спустя 14 дней после ревакцинации все подсвинки имели достаточно высокий уровень антител к вирусу РРСС, и среднее значение s/p по группе составило 2,00±1,02.

В ЗАО «Кудряшовское» Новосибирской области (общее среднегодовое поголовье 60 тыс. свиней, из них 6 тыс. свиноматок) была изучена эффективность эмульсионной инактивированной вакцины против РРСС.

Первая вспышка РРСС в этом свинокомплексе после полной смены поголовья была зарегистрирована в декабре 2005 года. Заболевание проявлялось уменьшением количества поросят в помете, увеличением рождения мертвых и мумифицированных поросят. Традиционная схема иммунизации репродуктивного поголовья до и после вспышки РРСС включала иммунизации против ПВИС, болезни Ауески, рожи и классической чумы свиней. С конца января 2006 года в хозяйстве стали применять программу вакцинации против РРСС с бустер-иммунизацией в 60 дней супоросности. Результаты исследований представлены в табл. 7.

Таблица 7 Данные об опоросах в свинокомплексе ОАО «Кудряшовское»

(комбинат №1) до и после программы вакцинации против РРСС Опоросилось Родилось Период Получено поросят на 1 опорос, гол.

свинок и поросят всего деловых слабых мертвых мумифиц.

св/м всего, всего, гол. гол.

опоросы у не привитых против РРСС свинок и свиноматок (вспышка РРСС) Февральапрель 2051 20841 (100%) (64,2%) (10,5%) (10,8%) (14,5%) опоросы вакцинированных против РРСС свинок и свиноматок Майиюль 2613 27696 (100%) (81,0%) (7,6%) (8,1%) (3,3%) Как видно из табл. 7, после применения программы вакцинации увеличилось среднее общее количество поросят на опорос и выход деловых поросят, значительно уменьшилось количество слабых, мертвых и мумифицированных поросят. Статистический анализ полученных данных подтвердил, что вакцинация свинок и свиноматок против РРСС в ЗАО «Кудряшовское» достоверно влияла (x2 3,84) на увеличение выхода живых и деловых поросят, а также уменьшение появления слабых, мертворожденных поросят и мумифицированных плодов у привитых животных по сравнению с невакцинированными.

Сыворотки крови поросят, полученных от привитых против РРСС свиноматок, были исследованы в ИФА ФГУ «ВНИИЗЖ» для оценки колострального иммунитета.

Антитела к вирусу РРСС у домолозивных поросят не выявляли, в 5-10-дневном возрасте позитивными были 88,9-90% поросят-сосунов, к 25-30-дневному возрасту их количество уменьшилось до 80%, к 45-дневному – до 47,4%, к 65 дням жизни – до 45%. С увеличением возраста животных средний уровень антител в сыворотках крови также снижался – с 60,9±20,2 - 65,1±18,8 у 5-10-дневных до 29,5±18,1 у 65-дневных. В 90 дней жизни количество серопозитивных поросят возросло до 52,4%, а средний уровень антител в сыворотках крови увеличился до 36,5±20,1, что свидетельствует об инфицировании части животных после снижения или окончания колострального иммунитета.

Таким образом, опыт применения в крупном свинокомплексе ЗАО «Кудряшовское» эмульсионной инактивированной вакцины против РРСС показал ее высокую эффективность для профилактики репродуктивной формы заболевания.

Высокая антигенная активность препарата была также подтверждена его применением на свинках и свиноматках в другом крупном свинокомплексе – ЗАО «Ботово»

Вологодской области (табл. 8).

Таблица 8 Результаты исследования сывороток крови ремонтных свинок и свиноматок, иммунизированных эмульсионной инактивированной вакциной против РРСС (ЗАО «Ботово» Вологодской обл., 2005-2006гг.) Возрастная Сроки отбора проб Общее Результаты исследования группа сывороток крови количество сывороток крови в ИФА «ВНИИЗЖ»

проб положи- отрица- уровень тельных тельных антител перед вакцинацией 188 0 (0%) 188 (100%) 8,3±3,7 Ремонтные после трехкратной свинки 110 110 (100%) 0 (0%) 62,2±21,5 иммунизации Основные после двукратной 43 41 (95,3%) 2 (4,7%) 68,9±30,8 свиноматки иммунизации Примечание: значение ИФА «ВНИИЗЖ» 30 – результат положительный.

–  –  –

Из данных табл. 9 наглядно видно, что в вакцинированных секторах за период доращивания было меньше заболевших животных на 8,1% и вынужденно убитых на 21,8%, сдано на санитарный брак на 9,6% меньше по сравнению с контрольной группой.

При этом среднесуточные привесы были выше в среднем на 3,5%. Гибель в обеих группах была практически одинаковой, однако общая сохранность за период доращивания в опытной группе была выше на 3,0%. Анализ заболеваемости показал, что в опытной группе большую часть заболевших составляли животные с нарушениями функций желудочно-кишечного тракта и травмами, а в контрольной группе - с респираторными нарушениями.

Таким образом, результаты применения эмульсионной инактивированной вакцины против РРСС показали ее высокую эффективность для профилактики репродуктивной формы РРСС и умеренную для профилактики респираторной формы заболевания.

На основании проведенных с положительным эффектом лабораторных и производственных испытаний и применения вакцины в условиях хозяйств была разработана нормативно-техническая документация на вакцину эмульсионную инактивированную против РРСС из штамма «КПР-96». В НТД вошли технические условия на вакцину, инструкция по применению и регламент по изготовлению и контролю препарата.

–  –  –

Из табл. 13 видно, что после применения эмульсионной инактивированной вакцины против РРСС и ПВИС в неблагополучных хозяйствах уровень репродуктивной патологии снижался в среднем с 55% до 5,6%, то есть в 9,8 раз. Кроме того, в этих хозяйствах резко уменьшался массовый отход поросят-сосунов.

Полученные данные свидетельствуют, что применение эмульсионной инактивированной вакцины против РРСС и ПВИС в неблагополучных хозяйствах различных регионов РФ показало ее высокую эффективность. В неблагополучных хозяйствах существенно снижался уровень репродуктивной патологии и резко уменьшался массовый отход поросят-сосунов.

Таким образом, на основании проведенных исследований была разработана эмульсионная инактивированная ассоциированная вакцина против РРСС и ПВИС, обладающая высокой антигенной и иммуногенной активностью.

Кроме того, в результате проведенных исследований и по рекомендации ФГУ «ВГНКИ» в 2005 году в ТУ 9384-026-00008064-99 на «Вакцину против РРСС и ПВИС эмульсионную инактивированную» были внесены дополнительные методы контроля на вязкость и полноту инактивации антигена. Были даны также более полные характеристики внешнего вида и безвредности вакцины, изменены параметры гемагглютинирующей активности парвовирусного антигена и методики контроля антигенной активности вируса РРСС, изменен метод контроля антигенной активности вакцины. Изменения, внесенные в действующие ТУ, были согласованы с ФГУ «ВГНКИ» и утверждены Россельхознадзором в установленном порядке.

2.2.8. Разработка и усовершенствование схем иммунизации против РРСС Результаты наблюдений показали, что после применения эмульсионной инактивированной вакцины против РРСС и ПВИС в неблагополучных хозяйствах резко уменьшался уровень репродуктивной патологии и массовый отход поросят-сосунов. После применения сухой культуральной вирусвакцины против РРСС значительно снижался уровень заболеваемости поросят-отъемышей с респираторным синдромом.

Однако в некоторых хозяйствах, где наблюдали массовое проявление репродуктивного синдрома, после применения традиционных схем иммунизации эффект оказывался не достаточно высоким. В связи с этим нами были проведены опыты по разработке новой усовершенствованной схемы вакцинации репродуктивного поголовья против РРСС.

Испытания были проведены в двух крупных свинокомплексах: «Белгранкорм»

Белгородской и «Надеево» Вологодской областей. Новая схема иммунизации свинок и свиноматок против РРСС включала двукратную иммунизацию перед осеменением согласно «Наставлению по применению вакцины …» и дополнительную бустервакцинацию между 60 и 70 днями супоросности. В последующем ранее иммунизированных свиноматок прививали первый раз однократно за три недели до случки (осеменения), второй раз - на 60-70 день супоросности. Для этих опытов использовали эмульсионную инактивированную вакцину против РРСС и ПВИС производства ФГУ «ВНИИЗЖ». Результаты сравнительного применения эмульсионной инактивированной вакцины против РРСС и ПВИС в разной кратности в ООО «Белгранкорм» представлены в табл. 14.

Таблица 14 Показатели эффективности вакцинации против РРСС в свинокомплексе «Белгранкорм» Белгородской обл.

До После После Показатели вакцинации двукратной трехкратной вакцинации вакцинации Опоросилось свиноматок (гол./мес.) 223 345 482 Абортировало свиноматок, % 5,4 2,0 0,5 Свиноматок с мертворождением, % 15,7 8,8 1,9 Прохолостов у свиноматок, % 23 16,6 11,2 Получено приплода в среднем (гол./мес.) 1774 2918 4392 Выход поросят на 1 свиноматку, гол. 8,0 8,5 9,1 Отход поросят-сосунов, % 9,7 5,5 3,7 Как видно из табл. 14, до проведения вакцинации в хозяйстве наблюдали серьезные нарушения репродукции у свиноматок, обусловленные циркуляцией вируса РРСС.

При этом процент абортировавших свиноматок составлял 5,4%, мертворождение наблюдалось у 15,7%, а прохолосты у 23% свиноматок, выход поросят на одну свиноматку составлял 8 голов и отход поросят в течение подсосного периода – 9,7%.

Через два года, в течение которых в хозяйстве проводили плановую двукратную вакцинацию свиноматок, эпизоотическая ситуация по РРСС в племенном стаде значительно улучшилась, а после введения дополнительной бустер-вакцинации свинок и свиноматок против РРСС в период 60-70-дневной супоросности показатели приблизились по значению к показателям благополучного стада.

Положительные результаты применения трехкратной иммунизации среди ремонтных свинок были также получены в свинокомплексе «Надеево» Вологодской области. В этом хозяйстве первая вспышка РРСС была диагностирована в 1999 году. Тогда заболевание проявлялось абортами на поздних сроках супоросности, мертворождением, появлением нежизнеспособных поросят и их гибелью в первые дни жизни. Применение эмульсионной инактивированной вакцины против РРСС и ПВИС позволило сократить патологию репродукции с 70% до 2% (табл. 13). Однако, у некоторых свинок первого опороса периодически продолжали наблюдать клиническое проявление болезни. После применения усовершенствованной (трехкратной) схемы вакцинации в хозяйстве перестали регистрироваться единичные аборты и рождение мумифицированных плодов у ремонтных свиноматок.

Таким образом, результаты проведенных испытаний усовершенствованной схемы иммунизации репродуктивного поголовья против РРСС показали ее высокую эффективность и преимущества перед традиционной схемой.

Полученные результаты были использованы при составлении и внесении соответствующих изменений в инструкции по применению эмульсионных инактивированных вакцин против РРСС, выпускаемых ФГУ «ВНИИЗЖ», и были утверждены Россельхознадзором в установленном порядке.

Всего за период с 1997 и по настоящее время (на 12.2008г.) было изготовлено: 30 серий вирусвакцины сухой культуральной против РРСС общим объемом более 4,5 млн.



Pages:   || 2 |
Похожие работы:

«Управление делами Президента Азербайджанской Республики ПРЕЗИДЕНТСКАЯ БИБЛИОТЕКА МЕЖДУНАРОДНЫЕ КОНВЕНЦИИ И АКТЫ ПО ПРОБЛЕМАМ ОКРУЖАЮЩЕЙ СРЕДЫ СОДЕРЖАНИЕ ЕВРОПЕЙСКАЯ КОНВЕНЦИЯ О ЗАЩИТЕ ЖИВОТНЫХ ПРИ МЕЖДУНАРОДНОЙ ПЕРЕВОЗКЕ (ПАРИЖ, 13 ДЕКАБРЯ 1968 Г.) (С ИЗМЕНЕНИЯМИ ОТ 10 МАЯ 1979 Г.).3 КОНВЕНЦИЯ О ВОДНО-БОЛОТНЫХ УГОДЬЯХ, ИМЕЮЩИХ МЕЖДУНАРОДНОЕ ЗНАЧЕНИЕ ГЛАВНЫМ ОБРАЗОМ В КАЧЕСТВЕ МЕСТООБИТАНИЙ ВОДОПЛАВАЮЩИХ ПТИЦ КОНВЕНЦИЯ ОБ ОХРАНЕ ВСЕМИРНОГО КУЛЬТУРНОГО И ПРИРОДНОГО НАСЛЕДИЯ.18 КОНВЕНЦИЯ ПО...»

«РОСТОВСКИЙ ОРДЕНА ТРУДОВОГО КРАСНОГО ЗНАМЕНИ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ А.В. КЛИМЕНКО ОСНОВЫ ЕСТЕСТВЕННОГО ИНТЕЛЛЕКТА Рекуррентная теория самоорганизации Версия 3.0 Ответственный редактор Доктор биологических наук Е.П. Гуськов Ростов-на-дону Издательство Ростовского университета К 49 УДК 001.5+001.2:168.2 Печатается по решению редакционной комиссии по биологическим наукам редакционно-издательского совета Ростовского государственного университета Рецензенты: доктор биологических наук А. И....»

«К ТЕРМОДИНАМИЧЕСКОЙ ТЕОРИИ ЭВОЛЮЦИИ Проф. Эткин В.А. Опровергается мнение о том, что биологическая эволюция противоречит термодинамике. Обсуждаются перспективы развития термодинамической теории эволюции. Введение. В течение многих поколений ученые задумывались над вопросом: является ли причиной эволюции случайное возникновение системы воспроизводящихся полимеров, или же она подчиняется общим физикохимическим закономерностям? В последнем случае возникают дополнительные вопросы: почему происходит...»

«Крисевич Т. О. – старший преподаватель кафедры общей биологии и ботаники Эволюционная теория Ч. Дарвина Ч.Дарвин родился 12 февраля 1809 г. в г. Шрюсбери. В 1826 г. студент медицинского факультета Эдинбургского университета. В 1828 г. Дарвин перевелся в Кембриджский университет на богословский факультет. Наряду с теологией будущий ученый увлекался естественной историей. В 1831 году после окончания университета Дарвину предложили место натуралиста на корабле «Бигль», который отправлялся в...»

«Перечень положений о проведении мероприятий для обучающихся и воспитанников образовательных учреждений Челябинской области в 2010 2011 учебном году № Наименование положений Сроки о проведении мероприятий проведения Экологобиологическая направленность 1. Положение о проведении областного конкурса научноинновационных проектов и исследовательских работ октябрь 2010 г. 1.1 «Чистая планета для нашего будущего» Положение о проведении областного конкурса «Вода на октябрь-ноябрь 1.2 Земле»,...»

«Молекулярная биология Лекция 5. Структура белков Скоблов Михаил Юрьевич Часть 1. Состав белков История открытия белка • В 1836 году Г.Мульдер высказал предположение о том, что все белки содержат один и тот же радикал, который он назвал протеином (от греческого слова первенствую, занимаю первое место). Мульдер, Геррит Ян • Протеин, по Мульдеру, имел состав Pr = C40H62N10O12.• В 1838 году Г.Мульдер опубликовал формулы белков, построенные на основании теории протеина. • В1902 году Эмиль Фишер...»

«***** ИЗВЕСТИЯ ***** № 1 (33), 2014 Н И Ж Н Е В О Л ЖС К О Г О А Г Р О У Н И ВЕ Р С И Т Е Т С КО Г О К ОМ П Л Е К СА АГРОНОМИЯ И ЛЕСНОЕ ХОЗЯЙСТВО УДК 635.21:631.811.98 ФОРМИРОВАНИЕ ЭЛЕМЕНТОВ ПРОДУКТИВНОСТИ КАРТОФЕЛЯ В ЗАВИСИМОСТИ ОТ ОБРАБОТОК РАЗЛИЧНЫМИ ПРЕПАРАТАМИ В АРИДНЫХ УСЛОВИЯХ НИЖНЕГО ПОВОЛЖЬЯ Н.А. Щербакова, аспирант Волгоградский государственный аграрный университет Н.В. Тютюма, доктор сельскохозяйственных наук ГНУ Прикаспийский научно-исследовательский институт аридного земледелия...»

«ГЕККОН_Доклад Тема Название команды Название доклада доклада Е Фитоняньки Родничок Из курса биологии, мы изучаем раздел «Растения», нам уже известно, что господствующей группой царства растений, являются покрытосеменные растения, у которых в ходе 1 эволюции, чтобы выжить в наземно-воздушной среде появилось множество приспособлений. Нам интересно узнать, какие приспособления заботы о потомстве, позволили покрытосеменным господствовать на земле. 2 Как растения заботятся о продолжении рода?...»

«http://www.bio.bsu.by/dekanat/petrovich.phtml Страница 1 Распечатать Сайт Биологического Факультета версия для печати или вернуться 100 лет со дня рождения Павла Григорьевича Петровича Биологический факультет БГУ. ПАВЕЛ ГРИГОРЬЕВИЧ ПЕТРОВИЧ 24 ноября 2009 года исполняется 100 лет со дня рождения Павла Григорьевича Петровича. С его именем тесно связана, по крайней мере, четверть всего периода истории существования биологического факультета, которым он руководил с 1953 по 1972 год. Это было время...»

«ЮНЫЙ ДРУГ! Природа – это тот светлый ручеек, что журчит затейливо в ложбине у села, пестрые цветы на лугу, у реки, рыба, что плещется у зорьки в пруду, бескрайняя лазурь поднебесья с белыми корабликами облаков словом, все то живое и неживое, что вокруг нас, в городе, в лесу, в поле. Чтобы полюбить природу, надо суметь увидеть ее неповторимые красоты, воспринять их своими чувствами. Любить же природу, значит оберегать ее. Природу может спасти от гибели любовь человека, человека экологически...»

«http://www.bio.bsu.by/molbiol/1.phtm Страница 1 Распечатать Сайт Биологического Факультета версия для печати или вернуться Ожог плодовых впервые зарегистрирован в Беларуси. Кафедра молекулярной биологии Биологического факультета БГУ. Ожог плодовых впервые зарегистрирован в Беларуси. 04-06-2008, 19:11 # molbiol ВНИМАНИЕ!!! В Беларуси впервые была обнаружена опасная инфекция растений бактериальный ожог плодовых. Впервые в Беларуси сотрудниками кафедры молекулярной биологии был выделен патогенный...»

«отзыв официального оппонента на диссертацию Выштакалюк Александры Борисовны на тему: «Фармако-токсикологическая и иммунобиологическая оценка продуктов комплексной переработки амаранта и влияние их на организм кур», представленную в диссертационный совет Д-220.02.01 при ФГБУ «Федеральный центр токсикологической, радиационной и биологической безопасности» на соискание ученой степени доктора биологических наук по специальностям 06.02.03. ветеринарная фармакология с токсикологией и 06.02.02....»

«Кезля Елена Михайловна ВОДОРОСЛИ ЕСТЕСТВЕННЫХ ВОДОЕМОВ ЦЕНТРАЛЬНО-ЧЕРНОЗЕМНОГО ЗАПОВЕДНИКА (Курская область, лесостепная зона) 03.02.01 — ботаника Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Москва Работа выполнена на кафедре микологии и альгологии Биологического факультета Государственного учебно-научного учреждения Московского государственного университета имени М.В.Ломоносова кандидат биологических наук Научный руководитель: Анисимова...»

«Вестник СамГУ — Естественнонаучная серия. 2005. №5(39). 169 БИОЛОГИЯ УДК 159.922.5 + 577.4 ВЛИЯНИЕ АНТРОПОГЕННЫХ ФАКТОРОВ НА ЭКОЛОГИЮ ЛИСИЦЫ ОБЫКНОВЕННОЙ В ОКРЕСТНОСТЯХ САМАРЫ1 Э.Д. Владимирова, Д.П. Мозговой2 c 2005 Дана характеристика биотопов обитания лисицы обыкновенной в антропогенных условиях. Рассмотрены экологические особенности питания, конфигурации индивидуальных участков, передвижений и общих адаптаций лисиц, обитающих в пригородной зоне современного мегаполиса. Введение Лисица...»

«Еремеев Дмитрий Николаевич АГРОБИОЛОГИЧЕСКОЕ ОБОСНОВАНИЕ СИСТЕМЫ ПОДГОТОВКИ И СОДЕРЖАНИЯ ЧЕРНОЗЕМНЫХ ПОЧВ В ЯБЛОНЕВЫХ САДАХ ЦЧР Специальность: 06.01.08 – плодоводство, виноградарство АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата сельскохозяйственных наук Мичуринск-наукоград РФ – 2015 Диссертационная работа выполнена в федеральном государственном бюджетном научном учреждении «Всероссийский научно-исследовательский институт садоводства имени И.В. Мичурина»...»



 
2016 www.os.x-pdf.ru - «Бесплатная электронная библиотека - Научные публикации»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.